Het-1A 人食道正常細胞

產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品編號：KMCC-001-0146

細胞名稱：Het-1A 人食道正常細胞

英文名稱：Human Esophageal Normal Cells

別稱：HET-1A，人食管上皮細胞

種屬來源：人

組織來源：正常食道

細胞形態(tài)：上皮細胞

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：BEGM 培養(yǎng)基（Bronchial Epithelial Cell Growth Medium）

生長條件：氣相：95%空氣、5%二氧化碳；溫度：37℃；濕度：70~80%

傳代方法：1:2至1:3，每周 2~3次

凍存條件：細胞凍存液：95% *培養(yǎng)液 + 5% DMSO，梯度降溫，液氮儲存

細胞用途：僅供研究之用

Het-1A細胞來源于1986年的一個尸檢組織，并轉(zhuǎn)染了含有RSV-LTR啟動子以及編碼SV40大T抗原的序列的質(zhì)粒pRSV-T。

細胞培養(yǎng)操作

1. 凍存細胞的復蘇

1.1 在超凈臺中取配好的*培養(yǎng)液5ml到15ml離心管中放至室溫備用。

1.2 快速將干冰或液氮保存的細胞株，放入37℃的水浴鍋后不停晃動凍存管，使其解凍并達到37℃，此過程盡量保持在3分鐘內(nèi)完成。（備注：此處注意，管身或管內(nèi)的液氮揮發(fā)完后才可放入，否則有炸裂風險）

1.3 將化凍的細胞液快速轉(zhuǎn)移至上述準備好培養(yǎng)基中，1000rpm 、4min離心收集細胞并傳代，傳代方法如下：

2. 細胞傳代處理

2.1 待長滿瓶底至80%以上時，貼壁細胞棄掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用1X PBS洗兩遍。

2.2 加1mL 0.25%的胰酶溶液，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，直至看到有細胞從瓶底上脫落分離。

2.3 加入2mL*培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打?qū)⑺屑毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落并轉(zhuǎn)移到離心管中，1000rpm 、4min離心收集細胞。

2.4 收集好的細胞用*培養(yǎng)基重懸，并輕輕吹打懸浮，若無特別說明，就按1:2~1:3的比例鋪新的培養(yǎng)瓶，放進培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)（每個細胞培養(yǎng)條件不同，大部分細胞5%CO2、37℃恒溫培養(yǎng)）。

3.細胞凍存處理

3.1 收集方法同上，

3.2 收集好的細胞用細胞凍存液（若無特殊說明，一般細胞凍存液成分為：10%血清+80%培養(yǎng)基+10%DMSO）懸浮，并按4℃、1h，-20℃、30min，-80℃過夜，液氮長期的溫度梯度進行保存。

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